2016-10-08   深圳市新阳唯康科技有限公司

    大多数情况下，原研药会使用最稳定的API晶型以避免在生产储存过程中发生晶型转变。仿制药企业通常会选择与参比制剂（RLD）相同的晶型，以保证相似的稳定性和溶出特性，因此，确定原研药的晶型至关重要。晶型分析通常有多种检测技术，如X射线粉末衍射，拉曼光谱，差示扫描量热，热重分析。然而，对于制剂中的无定形或低含量的API，可用的方法就比较局限。以下实例为在不同情况下，如何应用合适方法进行分析。

无定形API

    某制剂中API有两种固态形式：无定形和半水合物，为确定原研药与仿制药厂家生产的片剂（药片A，B）中API晶型是否一致，首先需要应用X射线粉末衍射和拉曼光谱对药片A，B中API晶型进行确定。

    对比药片A，B与API的X射线衍射图（见图1），可确定药片A中的API为半水合物，但不能确定药片B中API的晶型。因药片B中未能找到与API半水合物相对应的衍射峰，且除乳糖等，制剂中大多数辅料为无定形，故不能确定药片B中API是否为无定形。

图1 药片A（a），药片B（b），无定形API（c），API半水合物（d）X射线衍射图

    应用拉曼光谱技术，比对图2中药片A，B与API的拉曼光谱图，不仅可确定药片A中API为半水合物，而且能确定药片B中API为无定形，即原研药与仿制药中API晶型不一致，这将可能导致仿制药与原研药生物不等效。值得一提的是，通常辅料拉曼信号很弱，低于API信号，故拉曼用于不同厂家不同辅料的相同制剂时，可以在某些情况下完全排除辅料对API的干扰。该特性极利于制剂中低含量API的晶型检测，即使API的含量较低，其在制剂中的信号仍然有可能被检测到，这对于制剂中API的晶型鉴定尤为重要。  

图2 药片A（a），药片B（b），无定形API（c），API半水合物（d）拉曼光谱图

低含量API

    原研片中API含量较低，仅为0.5%。文献报道，该API有A，B，E三种晶型(图4），且晶型E很难制备。比较原研片与文献中三种晶型的X射线粉末衍射图，未找到与三种晶型相对应的衍射峰，再将原研片与片剂中主要辅料一水乳糖的X射线粉末衍射图比较，发现其X射线粉末衍射图与一水乳糖几乎一致（图3）；结晶形主辅料一水乳糖严重干扰了制剂中API的衍射信号。

图3 原研片与一水乳糖的X射线衍射图谱

来源：Analysis and stability of polymorphs in tablets: The case of Risperidone

图4 文献中API晶型A，B，E的X射线衍射图

    应用拉曼技术采集原研片的单点拉曼光谱，如图5所示，因激光光斑很小（μm），单次采集样品信号面积小，可基本排除辅料影响，采集到相对较纯的API光谱，而不与其他组分信号重叠，并通过匹配不同晶型间的拉曼特征峰，鉴定制剂中API的晶型。如图6所示，该原研片采集到的单点拉曼光谱为较纯的API光谱，不受一水乳糖的干扰，且晶型A，B有不同的拉曼特征峰，比对制剂中API晶型与晶型A，B的拉曼光谱（图7），可明显看出，原研片中的API为晶型A。

图5 拉曼信号采集原理图

图6 原研片，一水乳糖拉曼光谱

图7 原研制剂中API 拉曼图谱

来源：Analysis and stability of polymorphs in tablets: The case of Risperidone

图8 文献中晶型A, B拉曼光谱（API reference，(A) Form A; (B) Form B; (C) tablet; (P) placebo）

  综上所述，拉曼技术为原研制剂中晶型分析，尤其是对无定形API,和低含量剂型等复杂条件下的晶型分析提供了解决之道，是一致性评价工作中的一大利器。